À medida que se expira sobre uma solução de azul de bromotimol e hidróxido de sódio (NaOH), sua coloração azul característica vai se alterando. O azul de bromotimol é um indicador ácido-base que adquire cor azul em pH básico, verde em pH neutro e amarela em pH ácido. O gás carbônico (CO2) expirado reage com a água presente na solução (H2O), produzindo ácido carbônico (H2CO3). Este pode reagir com o NaOH da solução inicial, produzindo bicarbonato de sódio (NaHCO3):
CO2+ H2O → H2CO3
H2CO3 + NaOH → NaHCO3+ H2O
ARROIO, A. et al. Química Nova na Escola, São Paulo, v. 29, 2006.
A expiração, contendo gás carbônico, aumenta gradativamente a acidez do meio através da formação de ácido carbônico, que reage com a base até neutralizá-la, e depois fica em excesso. Ao longo do tempo, a cor do indicador passa de azul para verde (quando no momento em que a base é totalmente consumida), e depois para amarelo (quando o ácido carbônico se acumula).